Epilepsi, bronşiyal astıma, bradikardi, yeni oluşmuş koroner tıkanma, hipertroidzm, kardiyak aritmi ve peptik ülser durumlarında dikkatli kullanılmalıdır.

Büyük ölçüde Neostigmin verilecekse, aynı anda veya önceden Atropin sülfat enjeksiyonu önerilebilir. Burada Neostigmin ve Atropin için ayrı ayrı enjektörler kullanılmalıdır.

Bazı hastalarda aşırı duyarlık olabileceği göz önüne alınarak Atropin ve şok-önleyici ilaç daima el altında hazır bulundurulmalıdır.

Miyastenik kriz ile aşırı dozun neden olduğu kolinerjik kriz birbirinden ayırt edilmelidir. Her iki kriz de aşırı derecede kas güçsüzlüğü sonucunda verirler, fakat farklı tedavi gerektirirler.

Gebelerde: Labaratuvar hayvanları veya gebe kadınlar üzerinde iyi denetilmiş ve yeterli olan çalışmalar bulunmamaktadır. Gebe bir kadına verildiğinde fetal zarar yapıp yapmayacağı; üreme yeteneği üzerinde etkisi olup olmayacağı bilinmemektedir. Bu nedenle gebe bir kadına Neostigmin ancak açıkça gereksinme varsa verilmelidir.

Antikolinesteraz ilaçlar doğumu yakın gebe kadınlara intravenöz yolla verildiğinde prematüre doğum ve uterus tepkisine neden olurlar.

Emzikli Annelerde: İnsan sütü ile salgılandığı bilinmemektedir. Birçok ilaç insan sütü ile salgılandığından ve anne sütü emen bebeklerde Neostigmine ait ciddi advers gücü fazla olduğunda; anne ile ilaç alınımının göz önüne alınarak ya emzirmenin ya da ilaç alınımının kesilmesi gerektiğine karar verilmelidir.

Yaşlılarda: Yetişkinler için verilmiş dozlar kullanılmalıdır.

Çocuklarda: Pediatride etkinliği ve güvenirliliği saptnmadığından çocuklar için verilmiş olan vücut ağırlıkları ile ilgili dozlar aşılmamalıdır.